Микроскопические и культуральные исследования при аспергиллезе

При микроскопировании препаратов, приготовленных из патологического материала (наложения, узелки), отмечают наличие бесцветного мицелия. Для того чтобы препарат лучше просматривался, его обрабатывают 10- 20%-м раствором щелочи.

Для выделения чистой культуры возбудителя патологический материал высевают на среды Сабуро, Чапека, мясо-пептонный агар (pH 5,5-6,5). Аспергиллы — типичные аэробы. Колонии аспергиллов довольно разнообразны по размерам, окраске и интенсивности прорастания в питательную среду.

Рис. 37

Трехдневная культура A. fumigatus.

Окраска колоний связана с окраской конидий и более ярко выражена в зрелых культурах, богатых спорами. Цвет колоний бывает серый, желтый, оранжевый, черный, зеленый.

Для диагностики аспергил- леза применяют реакции иммуноэлектрофореза, тест ELISA.

Конидиеносцы со вздутыми г«* ловкими, в верхней части со стс- ригмлми. х400. Препарат в 50% водном растворе глицеринн.

Также для этих целей можно использовать реакции иммунофлюоресценции, преципитации и связывания комплемента. В экспериментальных условиях положительно зарекомендовали себя аллергические пробы.

A. fumigatus — культуры бархатистые, ровные или шероховатые, сначала белые, потом зеленые, в старых культурах почти черные. При микросконировании куль тур наблюдают септированный мицелий, короткие, гладкие конидиеносцы. Головка конидиеносцев колбовидная, черная, с эллиптическими стеригмами, расположенными одним слоем. Перитеции и склероции отсутствуют (рис. 37, 38).

Рис. 38

Трехдневная колония A. fumigatus на агаре Чапека, окружена каймой белого мицелия Рост при 35‘С.

A. flavus. — На агаре Чапека вырастают колонии с желто-зеленой спороносной зоной, Конидиеносцы могут быть септиро- ваны или несептированы. Сте- ригмы в больши нстве случаев одноярусные или двухъярусные.

Характерно обильное образование склероциев. Конидии грушевидные или шаровидные.

A. niger. — На агаре Чапека формируется колония с черной или темно-коричневой спороносной зоной. Мицелий белый. Конидиеносцы гладкие, бесцветные.

Конечное вздутие круглое. Стеригмы первого яруса цилиндрические. Конидии круглые.

A. clavatus. — На агаре Чапека вырастают колонии серо-зеленого или темно-зеленого цвета. Конидиеносцы бесцветные. Конидии эллиптические, тонкостенные.

A. nidulans. — Темно-зеленые колонии. Конидиеносцы бурые. Верхушечное вздутие куполовидное. Стеригмы двухъярусные. Конидии шаровидные, гладкие или шероховатые, зеленого цвета. Аскоспоры гладкие, красно-пурпурного цвета. Клейстокарпии шаровидные. Скле- роциев нет.

С целью подтверждения патогенности выделенных культур проводят экспериментальное заражение животных. Кроликам, морским свинкам и белым мышам внутривенно вводят суспензию спор гриба (500 000 -1 000 000 спор). Это приводит к развитию генерализованного процесса с типичным поражением органов дыхания, почек, сердца. При вскрытии в этих органах наблюдают множество мелких узелков с интенсивным развитием гриба.

Для воспроизведения экспериментального аспергил- леза у птицы ей скармливают корм, зараженный спорами гриба. Можно также с этой целью делать ингаляцию спор в дыхательный аппарат.

При дифференциальной диагностике аспергиллеза птиц необходимо исключить микоплазмоз, пуллороз и туберкулез.

У млекопитающих животных следует исключить туберкулез и паратуберкулез. Микологические исследования помогают дифференцировать аспергиллез от микозов, вызванных другими плесневыми грибами или акти- номицетами.